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Dans la recherche en sciences de la vie, les expériences pharmacologiques et toxicologiques et le diagnostic pathologique, lesalle de dissection animale et de prélèvement de tissusIl s'agit d'un outil qui sert de pont entre l'expérimentation in vivo et l'analyse des données en aval.et l'efficacité des contrôles de biosécurité déterminent directement l'intégrité des échantillons expérimentaux et la fiabilité des données de recherche.

Cet article analyse les principales considérations techniques des laboratoires modernes de dissection et d'échantillonnage d'animaux sous trois angles:la configuration des installations, les procédures d'exploitation normalisées et le contrôle de la biosécurité;.

I. Configuration fonctionnelle de base d'une salle de dissection et d'échantillonnage

Une salle professionnelle de dissection et d'échantillonnage des animaux doit soutenir l'ensemble du processus de travail, de l'euthanasie et de l'exposition aux organes à la fixation des tissus et à l'élimination des déchets.Conformément aux normes actuelles de construction de laboratoire, les principales configurations comprennent les deux aspects suivants:

1Infrastructures et plateformes de travail

Les procédures de dissection doivent être effectuées surdes tables de dissection ou des tables de nécropsie ventilées sous pression négative. pour les petits et moyens animaux de laboratoire (tels que les souris et les lapins),tables de nécropsie ventilées sous pression négativesont devenus la configuration standard.

Ces systèmes utilisentunités de traitement des gaz d'échappement et des gaz sous pression négativepour éliminer efficacement les gaz organiques et les odeurs telles quele formaldéhyde et le méthylmercaptangénérés lors de la dissection, protégeant les opérateurs de l'exposition à des aérosols nocifs.

La surface de travail doit également être équipée:

• Interface d'échappement des gaz anesthésiques

• Système d'éclairage localisé

• Plateau de stérilisation pour instruments

2Équipement d'échantillonnage et d'élimination des déchets

Préparation de l'instrument

Les instruments de dissection courants sont:

• Plaque de fixation pour animaux

• Ciseaux chirurgicaux de différentes tailles (ciseaux ophtalmiques, ciseaux tissulaires)

• Blades chirurgicales

• Des pinces dentées ou non dentées

• Pinces hémostatiques

• machines à couper les os

• Ligne de mesure et balance électronique pour la mesure des organes

Gestion des déchets

Selon leRèglement sur la biosécurité des animaux de laboratoire, la zone de dissection doit être équipée de:

• Sacs jaunes de déchets de danger biologiquepour les carcasses et les organes d'animaux

• Containers à vis tranchantespour aiguilles et lames usagées

Ces matériauxne doivent jamais être mélangés à des déchets ménagers ordinaires.

II. Procédures standardisées de dissection et de prélèvement de tissus

Pour améliorer la reproductibilité expérimentale et minimiser les artefacts causés par une manipulation inappropriée, la dissection et le prélèvement d'échantillons de tissus doivent suivre des protocoles techniques stricts.

1Préparation préopératoire et manipulation des animaux

L'anesthésie animale ou l'euthanasie doivent être effectuées rapidement pour éviter des réactions de stress prolongées.Autolyse, ce qui peut affecter l' exactitude deobservations au microscope optique ou au microscope électronique.

Examen externe

Avant la dissection, la surface corporelle de l'animal doit être systématiquement examinée, notamment:

• Ouvertures naturelles (bouche, nez, anus) pour les sécrétions anormales

• Condition et brillance des cheveux

• Présence de traumatisme, de gonflement ou de lésions

Ces observations reflètent souvent lesétat physiologique ou pathologique avant le décès.

2Exposition des tissus et observation des organes

Approche de dissection

Les animaux sont généralement fixés dans leposition couchée, et les cavités abdominale et thoracique s' ouvrent le long duincision de la ligne médiane.

Les observations suivantes doivent être consignées:

• Présence de liquide, de sang ou d'adhésions dans les cavités

• Taille, couleur et texture des organes

• Les lésions ou anomalies visibles

Documentation de la lésion

Pour les modèles d'animaux présentant des caractéristiques pathologiques spécifiques (tels que des tumeurs ou des zones nécrotiques), les lésions doivent être décrites de manière objective, notamment:

• Localisation

• Forme

• Couleur

• Taille (précise en millimètres)

• Relation avec les tissus environnants

3Spécifications techniques pour le prélèvement de tissus

Les procédures correctes d'échantillonnage sont essentielles à la qualité des échantillons.

Contrôle de vitesse et de température

Après le retrait, les tissus doivent êtreimmédiatement immergé dans un fixant pré-refroidi (généralement à 4°C).

Une exposition prolongée à température ambiante peut entraîner la libération d' enzymes hydrolytiques intracellulaires, qui peuvent endommager l' ultrastructure cellulaire.

Lorsque cela est nécessaire, des opérations de découpe peuvent être effectuées sursacs de glace ou plateaux réfrigérés.

Exigences relatives à la taille de l'échantillon

• échantillons de microscopie électronique:généralement pas supérieure à1 mm3en raison de la lenteur de pénétration des fixants.

• Parties de paraffine de routine:l'épaisseur du tissu doit être3 ̊5 mm, avec une taille recommandée de1.5 cm × 1,5 cm.

Normes d'utilisation des instruments

• La découpe doit être effectuée aveclames tranchantes.

• Il faut éviter de tirer, de scier ou de compresser avec des instruments ternes pour éviter les dommages mécaniques.

• Lorsque vous tenez un tissu,Les pinces non dentées doivent saisir le tissu conjonctif environnant plutôt que le tissu cible lui-même.pour prévenir les déformations cellulaires.

III. Sites de prélèvement standard pour les organes clés

Pour assurercomparabilité entre les expériencesSelon les directives de laboratoire émises par des institutions telles queRWD Science de la vie et Meifengli, les méthodes d'échantillonnage standard comprennent:

• Le cerveau:sections transversales dule cerveau antérieur (lobe frontal), le cerveau intermédiaire (lobe pariétal) et le cerveletDes points de prélèvement spécifiques sont nécessaires pour l'observation de l'hippocampe.

• Le cœur:incision longitudinale de lal'oreille au sommetpour exposer l'oreille droite, les valves auriculaires, le ventricule droit et la paroi ventriculaire gauche.

• Le foie:sélectionnez les deuxle plus grand lobe (par exemple, le lobe gauche)etplus petit lobe (p. ex. lobe caudé)Des échantillons de tissu doivent être prélevés.5 mm du bord, y compris la capsule et le parenchyme.

• Réne:

  • Rein gauche: section transversale à travers l'hylum pour exposer le bassin, le cortex et la moelle.

  • Rein droit: section longitudinale incluant l'hylum.

• Trait digestif:

  • Stomac: échantillon le long duune plus grande courbure du cœur au pylore.

  • Intestin: sections dele duodénum, le jéjonum (y compris les patchs de Peyer), l'iléum et le côlonLe contenu doit être enlevé et les tissus aplatis sur du papier filtre avant fixation pour éviter les boucles.

IV. Biosécurité et gestion des déchets

Pour les dissections impliquantmicro-organismes hautement pathogènes(par exemple, les modèles de primates non humains infectés), les procédures doivent être effectuées danslaboratoires de biosécurité de haut niveau.

Selon leLignes directrices techniques sur la biosécurité de la dissection animale, les mesures de contrôle suivantes doivent être mises en œuvre:

1Protection du personnel

Les opérateurs doivent porter:

• Réspirateurs N95 ou supérieurs

• Équipement de protection du visage

• Gants doubles

• Vêtements isolants étanches

Ces mesures de protection aident à prévenir les infections causées paréclaboussures de liquide corporel ou exposition à des aérosols.

2. Contrôle de l'environnement

Les dissections doivent être effectuées dans unenvironnement à pression négative, où passe le flux d'airSystèmes de filtration HEPA avant décharge.

3Élimination des carcasses

Après les expériences:

• Les carcasses animales et les matières contaminées doivent êtreautoclavéou stockés danscongélateurs de déchets médicaux à basse température désignés.

• L' élimination finale doit être effectuée leagences agréées de traitement des déchets médicaux par incinération.

V. Sélection et application des fixatifs

La fixationétape critique suivant le prélèvement de tissus, visant à stabiliser les structures cellulaires et à prévenir la dégradation et la décomposition enzymatiques.

Différents objectifs de recherche nécessitent différents fixatifs:

Notes importantes

• Le volume du fixant doit être10 à 50 fois le volume du tissu.

• Le temps de fixation typique varie de24 à 72 heures.

• Pour les organes contenant de l'air (tels que les poumons),un fixateur doit être injecté pour gonfler le tissu, assurant un contact complet avec la solution.

Conclusion

Unesalle de dissection animale et de prélèvement de tissusIl s'agit d'une plateforme technique complète intégrantcontrôle de la biosécurité, procédures opérationnelles standardisées (POS) et préparation précise des échantillons.

Le respect strict des protocoles d'échantillonnage, l'utilisation deéquipement professionnel de dissection à pression négative, et le respect des réglementations en matière de biosécurité sont essentiels pour:

• Assurer l'exactitude et la reproductibilité des données scientifiques

• Améliorer la gestion de la biosécurité en laboratoire

• Améliorer la qualité globale de la recherche expérimentale.